pcr的空白对照为啥也有引物（oligocalc如何看引物好坏）

pcr的空白对照为啥也有引物？

为了排除引物产生引物二聚体(dimer)带来的假阳性和结果误差。

一般做pcr时会都会设置一个对照孔，对照孔里面的成分除了不加模板，其他成分都和实验孔的成分一致。

设置对照孔的目的主要为了排除引物二聚体的产生，如果所要扩增的产物和引物二聚体的大小基本差不多，不做对照就无法确定该产物是目的产物还是引物二聚体，所以一般要做对照，以确保实验的可靠性。

oligocalc如何看引物好坏？

要验证引物是好是坏，可以采用以下方法：

1.使用质谱仪对引物进行质量分析，确保质量符合预期。

2.进行聚合酶链反应（PCR）来扩增目标序列，然后进行电泳分析，观察是否出现预期大小的片段。

3.进行测序验证，使用引物扩增的产物进行Sanger测序，与目标序列进行比对，确认是否一致。

4.如果有条件，可以进行实时荧光定量PCR，观察引物扩增的效率和特异性。

5.可以使用引物设计软件进行引物特性分析，如Tm值、二聚体形成等，确保引物设计合理。